Meios de cultura são composições de substâncias que fornecem nutrientes necessários para o desenvolvimento de microrganismos. Sendo favorecido o crescimento, é possível a identificação desses organismos através das suas atividades bioquímica e metabólica.
Além dos nutrientes, existem condições ambientais para o crescimento microbiano, como temperatura, pH, umidade, presença ou não de oxigênio (condição aeróbia e anaeróbia), entre outros.
A classificação dos meios de Cultura
Os meios de cultura são classificados de acordo com seu estado físico, podendo ser sólido, quando possui agentes solidificastes como o ágar; semissólido, quando a consistência de ágar e/ou gelatina é intermediária, ou líquido, quando não possui solidificastes, caracterizando-se como caldo.
Devido à diversidade dos microrganismos, existem vários meios de cultura específicos que atendem às exigências para o desenvolvimento de cada um. Os meios básicos permitem o crescimento, porém não atendem a nenhuma condição nutricional específica de um determinado microrganismo. São exemplos de meio de cultura simples o caldo e o ágar simples.
A condição de meios especiais ou complexos
Já os meios especiais ou complexos possuem condições específicas que atendem às exigências de determinado microrganismo, pois contêm substâncias que propiciam a produção de enzimas e secreções específicas de determinados microrganismos, e que impedem o crescimento de outros que não são de interesse de análise.
Um exemplo de meio de cultura especial é o Manitol, um meio salino com indicador de pH que tem a sua cor alterada quando ocorre o processo de fermentação e produção de ácido. Nesse meio é possível a identificação da bactéria Staphylococcus aureus.
De acordo com o tipo de microrganismo a ser identificado, os meios de cultura possuem diferenciação química, podendo ter extratos vegetais (malte, tomate), animais (carne), microrganismos (levedura) e sintéticos.
Quais as classificações funcionais?
Ainda, é estabelecida uma classificação funcional para os diferentes meios de cultura, que podem ser para:
- Pré-enriquecimento: para amostras que sofreram algum processo físico ou químico (Ex.: caldo lactosado);
- Enriquecimento: desenvolvimento de bactérias gerais (Ex.: Caldo Tetrationato);
- Seletivo: inibem o crescimento de alguns microrganismos e propiciam o desenvolvimento de outros ( Ex.: Manitol e MacConkey);
- Diferencial: permite a diferenciação de microrganismos parecidos (Ex.: Ágar sangue e MacConkey);
- Triagem: avalia as atividades metabólicas, permitindo a identificação de vários microganismos. (Ex.: Tríplice açúcar e ferro);
- Identificação: para realização de provas bioquímicas e funções fisiológicas do organismo a ser identificado (Ex.: Ágar citrato, Caldo nitrato);
- Dosagem: determinações de aminoácidos, vitaminas e antibióticos;
- Contagem: determinação quantitativa da população microbiana (Ex.: Ágar de Contagem em Placas, Ágar Baird-Parker)
- Manutenção: conserva os microrganismos em laboratório (Ex.: Ágar Sabouraud).
Outros meios de cultura utilizados:
- Ágar MacConkey: favorece o crescimento de bactérias gram-negativas (enterobacterias e não fermentadoras).
- Ágar Manitol: favorece o crescimento de bactérias estafilococos, sendo muito utilizado para isolamento de Staphylococcus aureus.
- Ágar Thayer- Martin Chocolate: isolamento de Neisseria gonorrhoeae e N. meningitidis.
- Ágar Selenito: inibe coliformes e outras espécies da flora intestinal, como estreptococos; favorece crescimento da Salmonella spp e Shigella spp.
- Ágar Sangue: favorece o crescimento da maioria dos microrganismos, sendo utilizado para identificação presuntiva de Haemophilus spp
- Ágar Löwestein Jensen: isolamento primário das micobactérias.
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Qual a Finalidade dos Meios de Cultura em Microbiologia?
Além dos nutrientes e condições favoráveis para esse cultivo, outros critérios devem ser considerados. Cada microrganismo possui necessidades diferentes, por isso, os meios de cultura são adaptados para satisfazer essas necessidades, utilizando os nutrientes corretos para o cultivo do microrganismo de interesse. Além disso, também deve ser considerado fatores como o pH e a quantidade de oxigênio ou mesmo a sua ausência.
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COMO SÃO CLASSIFICADOS?
Em microbiologia, os meios de cultura para o cultivo de bactérias são conhecidos como “meios artificiais” ou “meios sintéticos”, porque não ocorrem de forma natural, ou seja, eles são preparados em laboratório.
VARIAÇÕES DOS MEIOS DE CULTURA:
QUIMICAMENTE DEFINIDO
É o tipo de meio de cultura onde todos os constituintes são conhecidos. Uma vez preparado no laboratório pela adição de determinada quantidade, em gramas, de cada um dos componentes (carboidratos, aminoácidos, sais).
COMPLEXO
É aquele onde a exata constituição não é conhecida. Os “meios complexos” contêm extratos moídos ou digeridos de órgãos animais (corações, fígados, cérebros), peixes, leveduras, e vegetais. Fornecem os nutrientes, as vitaminas e os minerais necessários.
SÓLIDO
São meios de cultura preparados adicionando-se “Ágar” ao meio líquido e posteriormente colocados em tubos de ensaio ou placas de Petri, onde esse meio se solidifica. As bactérias crescem na superfície do meio sólido. O Ágar é um polissacarídio complexo obtido de alga marinha vermelha. Ele é utilizado como agente solidificante, muito semelhante à maneira como a gelatina é utilizada como agente solidificante na culinária. O Ágar Bacteriológico, por exemplo, é um tipo de ágar purificado onde impurezas, pigmentos e sais foram removidos ou reduzidos ao mínimo. Esse tipo de meio de cultura pode ser utilizado como agente gelificante em meio de cultura bacteriológico ou para determinar motilidade e crescimento de anaeróbios e microaerófilos.
LÍQUIDO
Os meios de cultura líquidos, sem agentes solidificantes, também são conhecidos como “caldos” e seu acondicionamento é feito em tubos de ensaio. Esses são utilizados na ativação das culturas, repiques de microrganismos, provas bioquímicas, dentre outros.
ENRIQUECIDO
Contém um grande suprimento de nutrientes que promove o crescimento de microrganismos fastidiosos. É geralmente preparado pela adição de nutrientes extras a um meio denominado “Ágar nutriente”. O Ágar-Sangue e o Ágar-Chocolate são exemplos de meios sólidos enriquecidos utilizados rotineiramente nos laboratórios de bacteriologia clínica.
SELETIVO
Os Meios de Cultura Seletivos contém inibidores adicionados que tornam inviável o crescimento de certos microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo que está sendo pesquisado. Por exemplo, o Ágar MacConkey inibe o crescimento de bactérias Gram-Positivas, selecionando assim, as bactérias Gram-Negativas.
DIFERENCIAL
Esse tipo de Meio de Cultura permite a distinção dos microrganismos que crescem no referido meio. Como, por exemplo, o Ágar MacConkey é frequentemente utilizado para diferenciar vários bacilos Gram-Negativos isolados de amostras de fezes. O Ágar Manitol salgado é utilizado para caracterizar o Staphylococcus Aureus. O S. Aureus não apenas cresce nesse meio, mas também converte a cor do meio originalmente rosa em amarelo, em razão da sua capacidade de fermentar o manitol. Os vários tipos de meios (enriquecido, seletivo, diferencial) não são mutuamente exclusivos. Por exemplo, no caso do Ágar MacConkey, ele é tanto seletivo como diferencial.
INOCULAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
Nos laboratórios de Microbiologia Clínica, os meios de cultura são rotineiramente inoculados com amostras clínicas (amostras que foram coletadas de pacientes com suspeita de doença infecciosa). A inoculação de um meio líquido envolve a adição de uma parte da amostra ao meio. A inoculação de um meio sólido ou meio em placa envolve a utilização de uma alça de inoculação estéril para a aplicação de uma parte da amostra à superfície do meio. Esse processo é conhecido como “semeadura em estrias”.
Fonte: //kasvi.com.br/qual-a-finalidade-de-meios-de-cultura-em-microbiologia/